文库 R_医药、卫生 肿瘤科

3.1不同来源干细胞的获取方式.pdf

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不同来源干细胞 的获取方式 山东省立医院 姜玉杰 干细胞的分类 •按照分化潜能: 全能型干细胞( 胚胎干细胞,万能细胞 ),多能性干细胞, 单能干细胞 •按照发育阶段: 胚胎干细胞 (ESC):主要是指来自囊胚内细胞团的细胞,有自我更新和 多向分化潜能,可以分化为内、中、外三个胚层的各类细胞。 成体干细胞 (ASC):处于干细胞状态的成体细胞,包括成年和未成年动 物组织中的各种干细胞,因此又称为组织干细胞。如神经干细胞、 造血 干细胞、骨髓间充质干细胞、上皮干细胞、肝干细胞、胰腺干细胞等。 成体干细胞的分类 •造血干细胞 •间充质干细胞 •神经干细胞 •骨及软骨干细胞 •心脏干细胞 •皮肤干细胞 •脂肪干细胞 •肠胃干细胞 胰腺干细胞 肝脏干细胞 前列腺干细胞 角膜干细胞 气管干细胞 血管内皮干细胞 生殖干细胞 肿瘤干细胞 胚胎干细胞的来源 •消化除去囊胚的透明带 ,将整个囊胚放到由小鼠成纤维细胞制成的饲养层 细胞上进行 培养; •在步骤1的细胞培养进行 8-10天后,将细胞团块切成小块,再接种到新鲜 的小鼠成纤维细胞饲养层细胞上进行 培养; •在步骤2的细胞生长到第 4~8代时,除去培养液,在饱和湿度、 37℃、5 %CO2下用0.05%胰酶-EDTA进行消化传代培养,分离得到人胚胎干细 胞系。 造血干细胞的来源 •骨髓移植(BMT):自体骨髓移植( ABMT)和异基因骨髓移( Allo-BMT) •外周血干细胞移植 (PBSCT):自体外周血干细胞移植( PBCST)和异 基因外周血干细胞移植( Allo-PBSCT) •脐血干细胞移植 (CBSCT) 骨髓造血干细胞获取 •术前准备 •硬膜外麻醉,术中监测生命体征。 •患者取俯卧位,选取两侧髂后上棘为穿刺点,每个穿刺点 /穿刺层面抽取不超过 10ml骨髓血,过滤后注射入无菌 采血袋中。 •一边抽髓,一边给患者静脉 输液。 •供受者血型不合: 主要不合( A/B/AB→O或AB→A/B):受者血浆中含有凝集供者红细胞的 抗原,会引起溶血反应。故应先 将骨髓血经 6%羟乙基淀粉处理去除红细胞后再输给受者 。 次要不合 (O→A/B/AB或A/B→AB):供者血浆中含有凝集受者红细胞的抗体 ,故应离心去除供者骨髓血 中的血浆后再输给受者。 主次均不合: (A→B或B→A):去红+去血浆 外周血造血干细胞获取 •利用动员剂促使造血干细胞从骨髓腔释放到外周血 中 •通过血细胞分离机从外周血中采集造血干细胞输入患者体内 。 •并将非造血干细胞血液回输给捐献 者 •每次大约采集 100毫升的富含造血干细胞 的采集物 •采集过程中注意补充钙剂,防止
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