3.4 胚胎干细胞的培养及临床应用.pdf

胚胎干细胞的培养及临床应用 山东省立医院 姜玉杰 干细胞的研究热点 研究热点干细胞： 胚胎干细胞 造血干细胞 神经干细胞 间充质干细胞 应用热点干细胞 : 骨髓干细胞 脐带血干细胞 外周血干细胞 组织工程 --生产器官 诱导分化成单能干细胞 扩增后直接使用 克隆性研究 直接治疗 诱导分化 组织工程 人类胚胎干细胞研究的历史 人类胚胎干细胞研究的历史 •1998年，威斯康星 -麦迪逊大学的 James Thomson教授分离了早期胚胎 的内细胞团，发现了人类第一株 ES细胞株 •1998年，约翰霍普金斯大学的 John Gearhart教授从胎儿性腺组织中分 离出人类胚胎干细胞 •以上这两种细胞中都可以分化成多能干细胞 胚胎干细胞 （EMBRYONIC STEM CELL ，ESC） •从早期胚胎内细胞团 （Inner Cell Mass）或胚胎原生殖细胞 分离出来的具有 自我更新、无限繁殖能力和全能分化能力的干细胞。 来自早期胚胎（ 4-5天），胚泡中的内细 胞群。一旦离开胚泡，内细胞群的细胞就可 以培养成胚胎干细胞。 胚胎干细胞系的建立过程 分离囊胚的内细胞团 分离胚胎生殖腺肌细胞 与成纤维细胞共培养， ES细胞非分化增殖 胚胎干细胞的鉴定 定向诱导分化成体干细胞功能细胞 胚胎干细胞移植 •胚胎干细胞移植 ：先提出患者的体细胞的细胞核，然后将其与除去了细胞 核的胚胎卵细胞相结合，形成一个带有患者遗传特征的胚胎干细胞，接着 再做增殖、分化，才能移植于人体。 •和异体干细胞移植一样，会彼此排斥，故得使用免疫抑制手段。 胚胎干细胞研究的意义 人胚胎干细胞的分离及体外培养的成功，将给人类带来医学革命。 •体外研究人胚胎的发生发育 •非正常发育（通过改变细胞系的靶基因） •新人类基因的发现 •药物筛选和致畸实验 ，减少人和动物的实验及临床研究 •作为组织移植、细胞治疗和基因治疗的细胞源 胚胎干细胞 的诱导分化 胎牛血清，骨髓基质细胞共培养 •胚胎干细胞 --------------------------------------------造血细胞 RA（维甲酸） • 胚胎干细胞 ----------------------------神经细胞 DMSO • 胚胎干细胞 ----------------------------肌肉细胞 TGF-β1, VEGF, βFGF（成纤维细胞生长因子） • 胚胎干细胞 ----------------------------血管和内皮细胞 RA+胰岛素+T3(三碘甲状腺原氨酸） • 胚胎干细胞 ----------------------------脂肪细胞 地塞米松，磷酸甘油 • 胚胎干细胞 ----------------------------骨细胞 基因转染 • 胚胎干细胞 ----------------------------胰岛素