造血干细胞的采集原理、冻 存及回输
山东省立医院
姜玉杰
造血干细胞 移植的原理
造血干细胞移植( hematopoietic stem cell transplantation,
HSCT))是经过大剂量放、化疗或其他免疫抑制预处理,清除受体体内的
肿瘤细胞、异常克隆细胞、阻断发病机制,然后把自体或异体造血干细胞通
过静脉回输给受体,以替代原有的病理性造血干细胞,从而使患者正常的造
血及免疫系统得以重建,从而达到治疗的目的的一种治疗手段。
HSCT的基本流程
•Injection:供者注射动员剂( G-CSF)
•Mobilization:干细胞动员
•Collection:干细胞采集
•Storage (Cryopreservation):干细胞分装储存(冻存)
•Conditioning:预处理
•Transfusion:干细胞回输
•Engraftment & recovery:植入和恢复
HSCT基本流程
造血干细胞的表面标志
•CD34 造血细胞的一种重要标志, CD34
+
细胞占骨髓细胞的 1%~4%
•CD117 是干细胞生长因子受体, IgSF(免疫球蛋白超家族)成员 ,
CD117
+
约细胞占骨髓细胞的 1%~4%
•50%~70%的CD117
+
骨髓细胞表达 CD34
供体造血干细胞采集标准
•选择合适的方式 ,通过外周血或骨髓采集供体的造血干细胞。
•造血干细胞需要采集到一定的数量 :
•单个核细胞须达到 4-6 ×10
8
/;
•CD34
+
细胞(造血干细胞 )在HLA半相合时,应达到达到 2 ~4 ×10
6
/kg
和1 ×10
7
/kg,全相合和自体造血干细胞移植患者可适当放宽标准;
•如有HLA抗原理想的脐带血 ,也是儿童患者合适的干细胞来源。
血液成份分离
基于它们不同的重力,在一定的离心力下分离细胞
.
Plasma
Packed
red cells
Buffy
coat
Granulocytes
1.085*
Monocytes
1.065*
Lymphocytes
1.071*
Platelets
1.048*
*Average specific gravity of cell type shown
*以上显示的为细胞的平均比重
自体造血干细胞的采集
•采集时机:
•WBC>510
9
/L
BPC>50(30)10
9
/L
CD34
+
细胞>1%
•采集用血细胞分离机 COBE Spectra
BaxterCS 3000
•采集细胞数(移植阈)
•MNC >6~810
8
/Kg
•CD34
+
>210
6
/Kg
•多发性骨髓瘤
(二次移植)
体外净化技术
•物理学方法:微波加热 (42-43℃)、光敏剂步化青 (MC-540)
•药物学方法 :选择药物:血液学毒性小 、易灭活、对肿瘤及正常造血干细胞杀伤存在较大差异 。
•免疫学方法 :将肿瘤细胞特异性单抗选择性结合在肿瘤细胞上 ,再通过适当方法清除肿瘤细胞 。方法:
补体依赖的细胞毒法 、免疫毒素依赖的细胞毒法 、免
3.2 造血干细胞的采集,冻存,及回输_20190808_114009.pdf