产品说明书 / Specification Sheet
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膜蛋白,核蛋白和胞质蛋白抽提试剂盒
产品编号:BSP002
一、产品简介:
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取膜蛋白,核蛋白和胞质蛋白,提取制备过程简便。制备的膜蛋
白,核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性,并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞
实验(Gel Shift Assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究,可以用于培养细胞或动
物组织中蛋白质的提取。每次可以处理 10
7
个细胞或 200mg动物组织,由溶液溶液A,溶液B,溶液C,DTT,蛋白酶抑
制剂,磷酸酶抑制剂,PMSF组成,可以使用 50 次。
二、产品特点:
1. 提取的蛋白最大限度地保持活性,可以用于 Pull Down,EMSA,IP,Enzyme Activity Assay 等实验。
2. 内含有的蛋白酶和磷酸酶抑制试剂可以避免蛋白质的酶解和蛋白质磷酸化状况被破坏。
3. 整个实验过程只需要一个小时左右。无需要超速离心,可以并行处理多个样本。
4.即可以用于培养细胞(50x10
7
个),有可以用于动物组织(50x200mg )蛋白质的提取。
三、试剂盒组成:
溶液 A 80ml
溶液 B 30ml
溶液 C 30ml
DTT 150ul
蛋白酶抑制剂 150ul
磷酸酶抑制剂 750ul
PMSF 1500ul
四、运输和保存条件:
常温下运输,收到后将溶液 B 2-8 度保存,DTT ,溶液 A, C 和蛋白酶抑制剂,PMSF 和磷酸酶抑制剂在-20 度
的环境中保存,保质期一年。
五、操作步骤:
1. 对于悬浮培养的细胞,取培养细胞 5×10
6
~1×10
7
个,弃去培养液,细胞用预冷的一倍PBS洗涤两遍。
2. 如果是组织样本,将 200mg 组织剪切成小块,加入适量的冰冷 PBS 洗涤两次后,4℃离心 700×g,3 min,
弃上清。
3. 将以上收集的细胞或组织中加入 1000μL 预冷的溶液 A【使用前每 1mL 溶液 A 加入 1μL DTT,10μL PMSF,
1μL 蛋白酶抑制剂和 5ul 磷酸酶抑制剂】,置玻璃匀浆器冰上均质 30~50 次,或超声破碎细胞,每次 30 S ,
3~4 次,每
膜蛋白,核蛋白和胞质蛋白提取方法-BSP002.pdf